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怎么選擇得心應(yīng)手的Elisa試劑盒
Elisa試劑盒在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)相當(dāng)普及，絕大多數(shù)ELISA試劑盒都是用于檢測(cè)未知樣本中抗原的濃度。用試劑盒當(dāng)然比自己慢慢摸條件快得多，ELISA試劑盒不僅可以讓實(shí)驗(yàn)更便利，往往還更加?，F(xiàn)在市面上的ELISA試劑盒既有國產(chǎn)也有進(jìn)口，數(shù)量繁多令人目不暇接，怎樣才能選出zui適用的產(chǎn)品呢，首先當(dāng)然得根據(jù)我們所要檢測(cè)的分子進(jìn)行檢測(cè)，除此以外也還有一些需要加以考量的因素。
*步、明確檢測(cè)何種蛋白。
第二步、明確編碼該蛋白的基因與其它哪些物種同源性。
第三步、尋找檢測(cè)這些物種蛋白的試劑盒。
第四步、咨詢商家ELISA是試劑盒使用的抗體類型：多抗還是單抗，單抗是針對(duì)什么抗原決定簇的。
第五步、做出自己的判斷該買哪個(gè)試劑盒。
從Elisa試劑盒的靈敏度、特異性、精密度、準(zhǔn)確度、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評(píng)價(jià)：
靈敏度：①為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力；②為試劑對(duì)大量樣品中陽性檢出的能力；
特異性：常用交叉反應(yīng)率表示。含有與待測(cè)物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應(yīng)，使測(cè)定結(jié)果升高，可能導(dǎo)致假陽性，所以交叉反應(yīng)是評(píng)價(jià)其質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)；
精密度：ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%，其值應(yīng)小于15%；定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線性范圍；
準(zhǔn)確度：通過添加回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)；
簡便性：指在不影響試劑的前三項(xiàng)指標(biāo)的前題下，實(shí)驗(yàn)和測(cè)定步驟越少越好，在定性實(shí)驗(yàn)中結(jié)果判斷簡單明了，定量試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算也應(yīng)簡單；
安全性：指試劑對(duì)操作者和環(huán)境安全無害無傳染性；
經(jīng)濟(jì)性：試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)?；蚣夹g(shù)進(jìn)步降低成本，而市場(chǎng)價(jià)格比較合理；
試劑評(píng)價(jià)：需要有的確證方法和確證的樣品進(jìn)行檢測(cè)。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型、抗體類型、交叉反應(yīng)、檢測(cè)方式來選擇Elisa試劑盒：
通常人們使用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)，雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測(cè)抗體之間，這種方法既靈敏又有效，受到了許多研究者的青睞。不過有時(shí)候雙抗夾心法并不是*選擇，例如有時(shí)候抗原特別小讓兩個(gè)大抗體難以附著，又或者抗體只有一個(gè)抗體結(jié)合位點(diǎn)。在上述情況下，競(jìng)爭(zhēng)性ELISA就更為適用，這種方法是采用帶標(biāo)記的純化抗原與樣本中無標(biāo)記的抗原進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)，以結(jié)合捕獲抗體。
