禽波氏桿菌PCR試劑盒的操作方法分享
點(diǎn)擊次數(shù)：370 更新時(shí)間：2023-06-06
PCR技術(shù)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是基于DNA可逆性復(fù)制過程的分子生物學(xué)技術(shù)，該技術(shù)以放大DNA作為檢測某類特定微生物、基因或設(shè)置一類基因突變的手段而廣泛使用。需要儀器設(shè)備和試劑盒等工具來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作?，F(xiàn)本文簡單介紹如何操作
禽波氏桿菌PCR試劑盒。
步驟1：實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
在進(jìn)行試驗(yàn)前，請從-20℃保存禽波氏桿菌PCR試劑盒的內(nèi)容物，冰凍在保險(xiǎn)柜中長達(dá)6個月或更久。嚴(yán)格損壞或超期的物品不要使用。將PCR換??nuclease-free水解凍，并遵循此后面指導(dǎo)的操作提示。
步驟2：混和PCR反應(yīng)液
干燥PCR溶液A+B混合物重，加入dH_2O100μL（每個樣本）。從原始DNA樣本中提取1μL并將其添加到管中。每個標(biāo)記使用完整盒子中的所有通量級別以確保溶液替代物可以容納一個確信區(qū)域。pipette上演沸騰30秒（龍頭混合澄清），離心10秒，并放入熱循環(huán)器中。
步驟3：樣品擴(kuò)增
進(jìn)入熱循環(huán)過程，程序?yàn)椋?5秒95℃→30秒57℃→30秒72℃）×35次和10分鐘72℃。放置PCR產(chǎn)品在冰上。
步驟4：電泳檢測
從PCR反應(yīng)管的每個標(biāo)簽中移動5μLPCR擴(kuò)增產(chǎn)物，并將其滴到薄板或管中。然后使用1-2％瓊脂糖/TAE凝膠進(jìn)行電泳處理。用溴化乙錠染色，并通過UV燈檢查這些凝膠片。根據(jù)需要確定擴(kuò)增產(chǎn)物的大小。
總之，在使用禽波氏桿菌PCR試劑盒時(shí)，需要了解其所采用的PCR技術(shù)并仔細(xì)閱讀說明書，并在實(shí)驗(yàn)室條件下非常謹(jǐn)慎地操作。
