亚洲综合精品第一页,午夜精品久久久久久久69堂,好男人在在线社区WWW在线影院,免费爽爽看片在线看片

產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

首頁>產(chǎn)品中心>PCR相關(guān)試劑>核酸純化>病毒基因組 DNA/RNA 快速提取試劑盒

病毒基因組 DNA/RNA 快速提取試劑盒

簡要描述:

病毒基因組 DNA/RNA 快速提取試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:豬(萊蕪)腹部脂肪干細(xì)胞(永生化) 20號染色體開放閱讀框165封閉多肽 腺病毒通用PCR檢測試劑盒 大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒 3磷酸甘油酸激酶(PGK)酶活性比色法檢測試劑盒 玉蜀黍長蠕孢 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白148抗體

更新時(shí)間:2024-01-12

分享到: 1
在線留言
病毒基因組 DNA/RNA 快速提取試劑盒

商品屬性:

產(chǎn)品名稱                    

規(guī)格                    

貨號                    

病毒基因組 DNA/RNA 快速提取試劑盒                    

50 次                    

A-Hc2009                    

QQ截圖20240110094643.jpg
PCR基本步驟及注意事項(xiàng)?

一、實(shí)驗(yàn)原理

PCR是體外人工選擇性擴(kuò)增DNA的一種方法,它類似于生物體內(nèi)DNA的復(fù)制。在生物體內(nèi)DNA復(fù)制需要模板、引物、DNA聚合酶、DNA解旋酶、 dNTPs;而體外PCR反應(yīng)同樣需要類似的成分,有模板、引物、PCR Buffer、Taq酶、dNTPs。其中引物是人工設(shè)計(jì)的特定序列,實(shí)現(xiàn)對特定位置的擴(kuò)增;PCR Buffer提供一個(gè)反應(yīng)的緩沖環(huán)境;反應(yīng)過程同生物體內(nèi)一樣,DNA雙鏈打開,引物結(jié)合模板,延伸形成新鏈。而這些過程在生物體內(nèi)靠DNA解旋酶解鏈,而在體外在通過控制反應(yīng)溫度實(shí)現(xiàn)的。如常用94℃變性模板DNA打開雙鏈,在退火溫度處引物結(jié)合到模板上,最后在72℃完成延伸,并反復(fù)重復(fù)此過程即可實(shí)現(xiàn)對特定片段DNA的大量擴(kuò)增。到第三循環(huán)開始才產(chǎn)生出和靶DNA區(qū)段相同的DNA分子,進(jìn)一步循環(huán)地產(chǎn)生出靶DNA區(qū)段的指數(shù)加倍。

在擴(kuò)增后期,由于產(chǎn)物積累,使原來呈指數(shù)擴(kuò)增的反應(yīng)變成平坦的曲線,產(chǎn)物不再隨循環(huán)數(shù)而明顯上升,這稱為平臺效應(yīng)。平臺期(Plateau)會使原先由于錯(cuò)配而產(chǎn)生的低濃度非特異性產(chǎn)物繼續(xù)大量擴(kuò)增,達(dá)到較高水平。因此,應(yīng)適當(dāng)調(diào)節(jié)循環(huán)次數(shù),在平臺期前結(jié)束反應(yīng), 減少非特異性產(chǎn)物。到達(dá)平臺期(Plateau)所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。

二、主要的成分

1.模板可以是多種形式,主要包括基因組DNA、質(zhì)粒DNA、攜帶病毒的基因組DNA、PCR產(chǎn)物,cDNA等,但不能為RNA。對于不同類型的模板,其主要不同在于預(yù)變性的時(shí)間以及模板的量。一般對于大的基因組DNA預(yù)變性時(shí)間10min足夠,質(zhì)粒DNA2min、攜帶病毒的基因組DNA預(yù)變性2minPCR產(chǎn)物預(yù)變性2min即可。

注意cDNA為單鏈DNA,但仍可做PCR的模板,只不過在第一輪循環(huán)時(shí)只有一個(gè)引物結(jié)合,合成另一條鏈。從第二輪開始,兩個(gè)引物均與特異位點(diǎn)結(jié)合,從而實(shí)現(xiàn)了與常規(guī)PCR的接軌。而同作為單鏈的RNA卻不能進(jìn)行PCR擴(kuò)增,原因就在于實(shí)現(xiàn)PCR反應(yīng)的是DNA聚合酶,只能特意識別DNA鏈。

2.對于模版的量來說,一般25ul體系DNA的質(zhì)量為50—100ng。對于基因組DNA由于其結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜,提取的濃度也往往比較大,為防止?jié)舛冗^大對PCR造成影響,故需對提取的DNA進(jìn)行梯度稀釋。否則濃度過高則可能會引起非特異性擴(kuò)增。對于質(zhì)粒及PCR產(chǎn)物由于其結(jié)構(gòu)簡單,且提取濃度一般較低,則無需稀釋。

PCR實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該注意的問題有哪些?

沒有ct

檢測結(jié)果遇到?jīng)]有Ct值情況,排查是否有以下問題:

1、循環(huán)數(shù)不夠(一般不超過45循環(huán),不僅背景值提高,定量也不準(zhǔn));

2、PCR程序設(shè)置錯(cuò)誤,檢測熒光信號的步驟有誤。一般SG法采用72℃延伸時(shí)采集,TaqMan法則一般在退火結(jié)束時(shí)或延伸時(shí)采集信號,另外熒光采集是否選中;

3、引物或探針降解。可通過PAGE電泳檢測引物和探針是否降解;

4、模板量可能降解或上樣量不足(不超過500ng,根據(jù)試劑盒說明書即可), 對未知濃度的樣本應(yīng)從系列稀釋樣本的最高濃度做起;如果發(fā)生模板降解,應(yīng)考慮樣本準(zhǔn)備中雜質(zhì)的引入及反復(fù)凍融的情況,建議將模板樣本小量分裝儲備,避免反復(fù)凍融;

5、引物探針是否合適(尤其是引物跨越內(nèi)含子,以確保擴(kuò)增基因組DNA;上下游引物Tm值超過4℃以上也會影響擴(kuò)增)。

ct值過晚

在相對定量中, Ct值一般控制在15—25之間比較好,如果在絕對定量中, 對低拷貝數(shù)的樣品,Ct值會增大, 但是一般不宜超過40循環(huán), 否則定量不準(zhǔn)確。

因此,判斷Ct值出現(xiàn)過晚是否屬于非正常情況, 需要根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和目的進(jìn)行。

1、擴(kuò)增效率低。引物之間或者引物和探針的比例不合適, 需要進(jìn)行優(yōu)化;引物或探針設(shè)計(jì)不合理, 需要重新設(shè)計(jì);

2、PCR程序不合適, 改用三步法進(jìn)行反應(yīng), 或者優(yōu)化退火/延伸溫度, 可以適當(dāng)降低退火溫度; 退火/延伸時(shí)間短(可以在推薦的時(shí)間條件下延長10s);

3、MgCl2濃度不合適,增加鎂離子濃度等。PCR各種反應(yīng)成分的降解或加樣量的不足;

4、PCR產(chǎn)物太長。PCR產(chǎn)物設(shè)計(jì)超過500bp;

5、模板中存在抑制物。用高純度模板進(jìn)行PCR檢測或?qū)⒛0暹M(jìn)行稀釋。

65.jpg

67.jpg

公司正在出售的產(chǎn)品:

豬葡萄球菌染料法熒光定量PCR試劑盒                    

二氫嘧啶酶樣3ELISA試劑盒 DPYSL3免費(fèi)代測試劑                    

甲型流感)病毒H6亞型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒                    

冬瓜皮染料法PCR鑒定試劑盒                    

表面膜免疫球蛋白DELISA試劑盒 mIgD免費(fèi)代測試劑                    

丁型肝炎病毒PCR檢測試劑盒直銷                    

山羊痘病毒PCR檢測試劑盒                    

補(bǔ)體成分1q子成分樣蛋白1ELISA試劑盒                    

難辨梭狀芽胞桿菌PCR檢測試劑盒                    

水痘帶狀皰疹病毒即人皰疹病毒型PCR檢測試劑盒                    

玻連蛋白/體外粘連蛋白ELISA試劑盒                    

奈瑟菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒                    

利什曼原蟲通用染料法熒光定量PCR試劑盒                    

超磷酸化微管相關(guān)蛋白tauELISA試劑盒                    

洋蔥伯克氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒                    

犬腺體病毒2型(犬傳染性喉氣管炎病毒)探針法熒光定量PCR試劑盒                    

刺猬?;D(zhuǎn)移酶ELISA試劑盒                    

乙型肝炎病毒核酸定量及YMDD變異聯(lián)合PCR測定試劑盒                    

饒氏無綠藻PCR檢測試劑盒                    

單純皰疹病毒Ⅰ型抗體ELISA試劑盒                    

牛傳染性胸膜肺炎染料法熒光定量PCR試劑盒                    

利什曼原蟲PCR檢測試劑盒                    

蛋白ATP1B4ELISA試劑盒                    

馬立克氏病病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)                    

鯉皰疹病毒通用探針法熒光定量PCR試劑盒                    

蛋白酪磷酸酶受體NELISA試劑盒                    

泌尿道致病性大腸桿菌(UPEC)探針法熒光定量PCR試劑盒                    

犬流感病毒32型探針法熒光定量PCR試劑盒                    

動力蛋白激活蛋白1ELISA試劑盒                    

南極犬牙魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒                    

柯薩奇 A16 型核酸檢測試劑盒                    

人核因子κB抑制物激酶β(IKK-β)試劑盒ELISA                    

牛分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒                    

病毒H5/H9亞型PCR檢測試劑盒(熒光PCR法)                    

人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)elisa試劑盒                    

禽腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒                    

鯉皰疹病毒3型探針法熒光定量PCR試劑盒                    

人鈣依賴性胞漿型磷脂酶A2(iPLA2)ELISA檢測試劑盒                    

同斑節(jié)對蝦桿狀病毒PCR檢測試劑盒                    

產(chǎn)氣克雷伯氏菌PCR檢測試劑盒                    

L選擇素(L-Selectin/CD62L)試劑盒 ELISA                    

病毒基因組 DNA/RNA 快速提取試劑盒光滑念珠菌探針法熒光定量PCR試劑盒                    

兔黏液瘤病毒PCR檢測試劑盒                    

人白介素31(IL-31)檢測試劑盒elisa                    

牛分支桿菌卡介苗PCR檢測試劑盒                    

 


夜色爽爽影院18禁妓女影院| 黑人巨茎精品欧美一区二区| 亚洲欧美色视频| H无码精品动漫在线观看| 97日日碰人人模人人澡| 久久这里只有精品国产66热99| 激情综合五月| 宝贝把腿张开我要添你下边动态图| 国产亚洲欧美精品综合在线| 男人免费天堂av| 亚洲精品在线免费观看视频| 国产又爽又黄又无遮挡的激情视频| 国产AV无码专区亚洲AV软件| JEALOUSVUE极品少妇| 疯狂做受XXXX高潮不断| 亚洲av无码片一区| 精品国产性色无码AV网站| 日本一区二区三区免费在线观看| 18禁真人抽搐一进一出在线| 尤物视频在线观看| 视频一区国产第一页| 伊人影视| 日韩欧美亚洲每日更新网| 伊人大杳蕉在线影院75| 亚洲AV无码专区青青草原| 日韩精品在线观看中文字幕| 日韩精品一区二区三区色偷偷| 精品无码久久久久久久动漫| 日本一本草久国产欧美日韩| 久久天天躁狠狠躁夜夜2020老熟妇| 免费无码久久成人网站入口| 亚洲欧美日韩网站| 4444亚洲人成无码网在线观看| 熟女乱中文字幕熟女熟妇| 小小的日本电影在线观看| 亚洲中文欧美日韩在线观看| 99久久国产综合精品女同| 欧美黑人巨大VIDEOS精品| 亚洲日韩一区二区一无码| 日韩一中文字幕在线| 野花影视大全在线观看免费高清1|